大孔吸附树脂纯化复方川芎方乙醇提取液的研究

【摘要】  目的 选择适用于纯化复方川芎方乙醇提取液的大孔吸附树脂和其最佳纯化条件。方法 通过静态吸附与解吸实验对3种大孔树脂进行筛选。通过单因素实验对最佳上样量、洗脱溶剂浓度、体积等进行考察。结果 最佳纯化工艺为采用HPD100型大孔吸附树脂，上样量为5.4∶7～5.5∶7(树脂∶原药材质量比)，依次用2 BV蒸馏水、7 BV体积分数50%乙醇进行洗脱。结论 使用该工艺可有效地纯化复方川芎方乙醇提取液，重现性好。

【关键词】  大孔吸附树脂;纯化;复方川芎方;阿魏酸;高效液相色谱法

Study on purifying the ethanol extract of compound Chuanxiong prescription with macroporous resin

　　JIANG Feng瞦in,FENG Jing瞱en,SHEN Xue瞞ei

　　(School of Traditional Chinese Medicine, Guangdong Pharmaceutical College, Guangzhou，Guangdong 510006, China)Abstract:Objective To study on purifying the ethanol extract of compound Chuanxiong prescription with macroporous resin. Methods Static adsorption and desorption experiments were carried out to screen on three kinds of macroporous resins. The sample volume, concentration and volume of elution solvent were optimized by single瞗actor experiments. Results HPD100 macroporous resin was selected. The sample volume is 5.4∶7 ～ 5.5∶7(Wresin∶Wraw medicinal herbs), eluting with 2 BV distilled water, followed by 7 BV 50% ethanol. Conclusion The ethanol extract of compound Chuanxiong prescription can be purified effectively by macroporous resin with good reproducibility.

　　Key words:macroporous resin; purification; compound Chuanxiong prescription; ferulic acid; HPLC

　 复方川芎方由川芎、藁本等药材组成，为临床治疗偏头痛的有效经验方。以阿魏酸为代表的有机酸类是方中主药川芎和藁本重要活性成分[1]，而复方川芎方乙醇提取液是有机酸含量较低的粗品，故有必要对其最佳纯化工艺进行筛选。

　　大孔吸附树脂是近十年发展起来的一类有机高分子聚合物吸附剂，目前已有用大孔吸附树脂分离纯化川芎提取物的报道[2-7]。本实验研究了复方川芎方乙醇提取液中阿魏酸在D101、HPD100和AB8 3种大孔吸附树脂上的吸附和解吸能力，并进一步筛选出最佳纯化工艺，为复方川芎方的开发应用奠定了基础。

　　1 仪器与材料

　　1.1 仪器

　　日本岛津LC20A高效液相色谱仪;AS3120A型超声波清洗器(天津奥特赛恩斯仪器有限公司,频率60 kHz,功率500 W);RE52A型旋转蒸发器(上海亚荣生化仪器厂);乙腈、甲醇(色谱纯，美国迪马公司)，水为屈臣氏蒸馏水，其它试剂均为分析纯。

　　1.2 试药

　　复方川芎方乙醇提取液(自制：将方中药材粗粉以体积分数55%乙醇浸泡36 h，收集8倍量渗漉液，浓缩至含生药量为0.1 g·mL-1);D101型大孔吸附树脂(河南开封树脂厂);HPD100型大孔吸附树脂(河北沧州宝恩化工有限公司);AB8型大孔吸附树脂(河北沧州宝恩化工有限公司);阿魏酸对照品(中国药品生物制品检定所，批号110773200611)。

　　2 方法与结果

　　2.1 定量分析方法

　　2.1.1 色谱条件 色谱柱：Kromasil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm，5 μm);流动相：乙腈菜(体积比15∶85，磷酸调pH值为3.5);流速：1 mL·min-1;柱温：25 ℃;检测波长：320 nm;进样量：20 μL。

　　2.1.2 对照品溶液的制备及线性关系的考察 精密称取阿魏酸对照品5.730 mg，置25 mL容量瓶中，加甲醇溶解并稀释，分别吸取0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mL置10 mL容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，按“2.1.1”项下条件，依次进样20 μL，测定峰面积，以峰面积(Y)对阿魏酸进样微克数(X)进行线性回归，得回归方程Y=5×106X-8107.2，r=0.999 9，表明阿魏酸的进样量在0.045 8～0.458 4 μg范围内与峰面积线性关系良好。

　　2.1.3 样品测定 将收集的样品液定容，摇匀，过0.45 μm微孔滤膜，进样，根据回归方程计算阿魏酸含量。

　　2.2 树脂的预处理