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| 全部作者： | 刘芬 沈守荣 王晓艳 李宏韬 彭娅 廖曼甜 郭勤 刘劼 |
| 第1作者单位： | 中南大学湘雅3医院消化内科 |
| 摘要： | 目的：（1）探讨NGX6基因对结肠癌Wnt/Beta-catenin信号传导通路下游靶分子的影响，明确NGX6对Wnt/Beta-catenin信号传导通路是否存在抑制作用。（2）阻断Wnt通路对NGX6转录水平表达的影响，明确NGX6与Wnt通路之间是否存在反馈调节。方法：（1）将pCMV-myc-NGX6真核表达载体及pCMV-myc空白载体瞬时转染结肠癌细胞系SW620，采用Western-blot的方法检测转染NGX6前后Wnt/Beta-catenin信号传导通路下游靶分子c-jun, c-myc, cyclinD1的表达。（2）构建LEF1缺失突变体（缺乏N-末端β-catenin binding domain）pcDNA3.1(+)-LEF1DN瞬时转染SW620细胞，阻断Wnt通路，并通过Western-blot及TCF-4荧光素酶报告质粒检测的方法确定阻断的效果.(3)通过RT-PCR检测Wnt通路阻断后NGX6的表达改变情况，判断Wnt通路与NGX6之间是否存在反馈调节作用。结果：(1) NGX6基因瞬时转染结肠癌细胞系SW620后,可以明显下调Wnt/Beta-catenin信号传导通路下游靶分子c-jun, c-myc, cyclinD1的表达.(2)成功构建真核表达载体pcDNA3.1(+)-LEF1DN, Western-blot及TCF-4荧光素酶报告质粒均证实pcDNA3.1(+)-LEF1DN对Wnt通路具有阻断作用（3）瞬时转染pcDNA3.1(+)-LEF1DN抑制Wnt通路后，NGX6在转录水平的表达有上升。结论：（1）NGX6对Wnt/Beta-catenin信号传导通路下游靶分子具有负性调节作用。（2）阻断Wnt通路对NGX6的表达有影响，Wnt通路与NGX6之间可能存在反馈调节作用。 |
| 关键词： | NGX6基因; 结肠癌; 信号传导; Wnt/beta-catenin 远程下载 (免费PDF全文) |
| 发表日期： | 2007年12月19日 |
| 同行评议： | （暂时没有） |
| 综合评价： | （暂时没有） |
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