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调脂汤对动脉粥样硬化大鼠血脂及主动脉VCAM-1表

2013-10-26 01:06   目的：研究调脂汤对动脉粥样硬化大鼠血脂及主动脉VCAM-1表达的影响。 方法：40只Wistar大鼠分为4组，正常对照组、模型组、辛伐他汀组、调脂汤组血清总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）指标变化；观察血清VCAM-1的表达情况。  结果：灌胃1个月后，辛伐他汀组和调脂汤组大鼠血清TC、LDL-C值较模型组显著降低（P<0.05），与灌胃前比较TC、LDL-C值也显著降低（P<0.05），辛伐他汀组较调脂汤组TC、LDL-C值稍低；血清VCAM-1的表达情况：辛伐他汀组没有改变，而调脂汤组的表达水平明显减少。  结论：调脂汤能降低动脉粥样硬化大鼠的血脂及主动脉VCAM-1的表达。
调脂汤；动脉粥样硬化大鼠血脂；主动脉；VCAM-1  

        近年来，心脑血管疾病已超过肿瘤，成为我国高居发病率和死亡率第一的疾病，而动脉粥样硬化（AS）是其重要的病理基础，严重危害人类的生命健康。如何有效地防治AS是广大医务工作者正努力寻求解决的任务。目前临床上抗AS主要以西药降脂药物为主，取得了一定效果，但也不同程度存在着肝功能损害、肌病、胃肠道反应等副作用。
        1材料和方法
        1.1实验动物与材料。Wistar大鼠40只，清洁级，体重180~220g，雄性，由黑龙江药物安全性评价中心提供。生理盐水，石家庄四药有限公司生产，批号：091124801；调脂汤水煎液由黑龙江中医药大学附属第一制剂室提供；辛伐他汀购自北京诺华制药有限公司；TC、LDL-C试剂盒购自武汉亚法生物有限公司；Trizol  reagent购自美国Z nvitrogen公司；反转录试剂盒购自美国Promega公司；TaqDNA聚合酶购自北京鼎国生物技术公司；淋巴细胞分离液购自北京鼎国生物技术发展公司；血管细胞黏附分子1引物购自上海生工生物工程技术服务有限公司。 本文来自中国科教评价网
        1.2实验方法。
        1.2.1实验分组及模型建立。清洁级健康雄性Wistar大鼠，体重180~220g，实验前均以普通饲料适应性饲养一周后，称重，随机分为4组，每组10只，正常对照组（NC）-喂普通饲料；模型组（HC）-喂高脂饲料；辛伐他汀组（FC）-喂高脂饲料；调脂汤组（DC）-喂高脂饲料。以上4组喂饲周期为1个月，正常组、模型组灌胃生理盐水1 ml/100g.d;调脂汤组给与调脂汤水煎液1ml/100g.d，辛伐他汀组给与辛伐他汀混悬液0.571mg/100g.d，各组喂食饲料不变，各组均灌胃1个月。
        1.2.2指标检测。实验各组均与灌胃前及灌胃1个月后尾静脉采静脉血2ml，离心取血清，采用全自动生化分析仪检测血清总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）水平。取大鼠主动脉组织标本50mg，用SP免疫组织化学法检测VCAM-1，Trizol一步法提取主动脉组织总RNA，并进行逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）检测。血管细胞黏附分子引物序列如下：正义，5’-CGG TCA TGG TCA AGT GTT TG-3’；反义，5’-AGC CAC CAA TCC ACA CAG-3’，预计扩增产物长度560bp。反应参数：预变性，95℃，2min，变性，95℃，1min，退火，59℃，1min，延伸，72℃，1min。反应进行32个循环，未延伸72℃，5min。取10ml扩增产物进行2g/l琼脂糖凝胶电泳，紫外线下扫描记录电泳结果。    
        1.3统计学处理。数据处理以计量资量用X±S表示，多组间比较用方差分析。以P<0.05为统计学上差别有显著意义。
        2结果 本文来自中国科教评价网
        2.1血脂测定。各组均与灌胃前及灌胃1个月后尾静脉采静脉血检测，甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C），观察血脂变化。灌胃前及灌胃1个月后血脂变化水平见表1、表2：
        表1灌胃前各组血脂水平（mol/L）(X±S)
        
        *与NC组比较有显著差别（P<0.05）
        灌胃前各组与NC组比较，TC、LDL-C及HDL-C均显著升高（P<0.05），表明高血脂大鼠模型复制成功。
        表2灌胃1个月后各组血脂水平（mol/L）(X±S) 
        
        *与NC组比较有显著差别（P<0.05），#与HC组、FC组比较有显著差别（P<0.05）。
        灌胃1个月后各组与NC组比较，TC、LDL-C及HDL-C均显著升高（P<0.05）；但DC组TC、LDL-C值较HC组降低，差别具有显著意义（P<0.05），与FC组比较略高。
        2.2用SP免疫组织化学法检测VCAM-1,以逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）检测VCAM-1的表达。见表3
        表3各组动物单个核细胞中VCAM-1的表达情况