应用PVA构建妊娠相关血浆蛋白A固相时间分辨荧光(3)

　　1.2.6　生物素标记10E1抗体［12］　用二甲亚砜制备硫代琥珀酰亚氨6生物素氨基惨阴ト芤(10 mg/ml)，将抗体10E1溶于0.1 mol/L硼酸钠溶液(pH 8.8)，每1 mg抗体中加硫代琥珀酰亚氨6生物素氨基布乎ダ嗳芤210 μg混合，室温放置4 h，在上述溶液中加入20 ml 1 mol/L NH4Cl，室温反应10 min，将反应液进行透析，除去未结合的生物素，将抗体浓度用分析缓冲液配置成8 ng/μl，-20 ℃保存备用。

　　1.2.7　单克隆Hyb234—5抗体包被96孔微滴定板　将抗体溶于0.1 M磷酸盐缓冲液(pH 4.9)，配置成5 μg/ml抗体溶液，在每一孔中加入80 μl抗体溶液，室温反应20 h，然后用生理盐水洗3次，然后每孔加120 μl 0.05 M Tris睭cl 缓冲液(pH 7.4含0.9%生理盐水、0.05% NaN3、0.5%小牛血清白蛋白BSA)浸泡2 h。吸干缓冲液，干燥，密封4℃保存。

　　1.2.8　样本收集、定标、灵敏度、精密度和回收实验分析过程　选取怀孕8周、9周、11周妇女血清各一份，经PE公司的DELFIA试剂和D