甲状腺微小乳头状癌的形态学和免疫组织化学研(2)
2015-01-20 01:42
导读：主要诊断指标：核变大、拉长，呈卵圆形；核拥挤、重叠、极向紊乱；毛玻璃样核；核不规则，核沟明显，核内包涵体。次要诊断指标：流产型乳头（ab
主要诊断指标：核变大、拉长，呈卵圆形；核拥挤、重叠、极向紊乱；毛玻璃样核；核不规则，核沟明显，核内包涵体。次要诊断指标：流产型乳头（abortive papillae）；明显拉长或不规则的滤泡；浓缩的胶质；砂粒体；滤泡腔内多核组织细胞。出现至少3个主要指标，或2个主要指标+至少4个次要指标可诊断为PTC。
1.5 IHC结果判定
CK19、Galectin-3均为细胞质染色，MC、CD56均为细胞膜染色。参考Beesley［2］的评分方法：染色强度依次为无色0分、淡黄色1分、棕黄色2分、棕褐色3分；染色范围以阳性细胞所占百分比打分，未见阳性染色为0分、阳性细胞<25%为1分、25%～50%为2分、＞50%为3分。染色强度与染色范围的和即为IHC反应结果，积分为0判为阴性，1～2分判为“+”，3～4分判为“++”，5～6分判为“+++”，阳性表达包括“+～+++”。
1.6 统计学处理
采用SPSS13.0统计软件包进行分析，率的比较采用χ2检验，以P<0.01为差异有统计学意义。真实性指标计算方法：灵敏度Se=a/（a+c）；特异度Sp=d/（b+d）；准确度=（a+d）/（a+b+c+d）。其中a为真阳性例数，b为假阳性例数，c为假阴性例数，d为真阴性例数。
2 结果
2.1 形态学特征
在223例PTM中，结节大小为0.1～1.0 cm。镜下呈放射状生长者84例，有部分包膜者139例。间质明显硬化者170例，无明显硬化者53例。以乳头状排列为主者137例；以滤泡状排列为主者86例，占38.6%，其中完全呈滤泡样排列者33例。滤泡细胞均增生活跃，穿插于瘢痕样间质或周围正常滤泡之间，并与周围滤泡对比鲜明。PTC核的特征典型者192例，占86.1%（图1）。核的特征不够典型者31例，占13.9%。在32例对照组中，以滤泡状排列为主者29例，以乳头状排列为主者3例。滤泡细胞增生较活跃，多数结节内可见萎缩的滤泡，结节与周围的滤泡对比不鲜明。少数病例核轻度不规则，其中偶见核沟者4例，灶性区呈毛玻璃样核改变者2例。细胞质均相对较少且淡染，未见鳞状化生改变，未见砂粒体和浓缩胶质改变。
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2.3 免疫表型
CK19、Galectin-3、MC及CD56在研究组中的阳性表达率分别为100.0%、98.6%、98.6%和4.0%，而在对照组中，4者的阳性表达率分别为37.5%、12.5%、18.8%和68.8%。2组比较差异有统计学意义（χ2=57.00，83.43，75.12，51.88，P均<0.01，表1）。CK19、Galectin-3、MC的阳性表达见图2。
2.4 4种抗体的灵敏度、特异度和准确度比较
根据统计学处理中的公式计算CK19、Galectin-3、MC及CD56的灵敏度、特异度和准确度，结果见表2。
3 讨论
PTM是指偶然被发现的、直径1 cm或更小的PTC［3］。这类肿瘤常贴近甲状腺被膜，伴有硬化，多无包膜。最小的PTM（<1 mm）常由滤泡构成，间质硬化和包膜浸润不明显。较大的PTM常有间质硬化，可出现乳头状结构，甚至全部由乳头构成，但较少见。本研究显示PTM有部分包膜者占62.3%（139/223），呈放射状生长者占37.7%（84/223），间质硬化显著者占76.2%（170/223），以滤泡状排列为主者占38.6%（86/223）。以滤泡状排列为主的病例比例远高于进展期PTC中滤泡型所占的比例，有包膜的病例多呈乳头状排列，呈放射状生长者多为滤泡状排列。核具有典型PTC的特征［4］，但部分病例核的特征不够典型（31例，占13.9%），尤其是完全呈滤泡状排列的病例，核的不规则性较轻，核沟、包涵体不易见到，核膜增厚不明显，核仁较小，病理诊断较困难。而某些增生性病变滤泡细胞增生较活跃，核轻度不规则，可见灶性区毛玻璃样核改变，甚至可见核沟或包涵体，间质也可以出现硬化和钙化。PTM（尤其是呈滤泡状排列者）需要与增生性病变相鉴别。其区别是PTM滤泡细胞普遍增生活跃，核普遍较大、变长、变卵圆、不规则，核沟和包涵体易见，核膜较厚，核仁较明显，细胞质普遍较丰富，细胞形态与周围滤泡细胞截然不同，肿瘤性滤泡在胶原化间质中呈浸润性生长，常见肿瘤性滤泡穿插于周围滤泡之间，并形成鲜明对比。
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目前普遍认为CK19、Galectin-3、E-cadherin、HBME-1、ret/PTC等的阳性表达对诊断PTC意义较大［1］。CK19主要标记各种单层腺上皮，用于腺癌的诊断。多数文献报道CK19在PTC中呈细胞质弥漫强阳性表达，而在正常甲状腺组织、结节性甲状腺肿、甲状腺腺瘤中不表达或灶性表达［5-7］，CK19是鉴别PTC的良好标志物［8］。滕晓东等［9］认为CK19阳性表达是滤泡细胞增生恶变的重要标志，不但可作为对甲状腺良、恶性的鉴别，尤其是对PTC诊断的重要依据，而且还可以提示恶变倾向。在甲状腺良性病变中，如果有少量腺体呈CK19中、强阳性而明显突出于背景滤泡，要仔细寻找原发灶，特别是微小PTC灶，以免漏诊。但Schelfhout等［10］认为CK19在PTC诊断中价值有限，其表达仅是增加了PTC的可能性。本研究74例PTM中CK19均呈弥漫强阳性表达（100.0%），增生性病变阳性表达率为37.5%，且均为灶性表达，提示CK19对PTC虽无特异性，但弥漫性强阳性表达对PTC的诊断有重要意义。
Galectin-3属凝集素（lectin）蛋白家族成员，最近报道Galectin-3过度表达与多种恶性肿瘤，如胃肠、前列腺、乳腺、甲状腺等肿瘤密切相关。Coli等［11］研究表明，Galectin-3在不同类型甲状腺癌组织中的表达有差异，其中在PTC组织中的表达率最高，在甲状腺滤泡癌组织中有较高的阳性率，在结节性甲状腺肿和滤泡性腺瘤组织中表达率较低，Galectin-3的表达与滤泡细胞的异型增生和恶变存在联系，其表达水平检测有助于判断良恶性。Sapio等［12］研究Galectin-3在62例甲状腺良性结节、74例PTC、32例滤泡癌中的表达率分别为27.0%、91.9%、75.0%，指出Galectin-3在鉴别诊断甲状腺良性、增生性病变和PTC中有一定的指导意义。本研究74例PTM中73例Galectin-3中强阳性表达，增生性病变组仅4例阳性表达，其诊断PTM的灵敏度、特异度和准确度分别为98.6%、87.5%和95.3%，是PTM诊断与鉴别诊断较为理想的抗体。
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MC是用于间皮瘤诊断的相关抗体，用于甲状腺病理诊断的报道尚少。文献报道MC在PTC中呈高表达，是诊断PTC的较好标志物［13］。王仪等［14］研究20例结节性甲状腺肿、50例甲状腺腺瘤、100例PTC和8例甲状腺滤泡癌，MC表达率分别为25.0%、50.0%、100.0%和87.5%，MC在PTC中敏感性更高，癌与非癌组比较差异有统计学意义（P<0.01）。本研究中MC的灵敏度为98.6%，准确度为93.4%，特异性81.2%，提示MC在PTM诊断中特异性较差，需结合其他指标综合判断。
CD56是神经细胞黏附分子，主要用于视网膜母细胞瘤、髓母细胞瘤、星形细胞瘤、神经母细胞瘤等肿瘤和NK细胞的研究［15］。其在甲状腺肿瘤诊断中的应用罕见报道。Demellawy等［16］研究75例甲状腺癌（72例PTC、2例滤泡癌、1例嗜酸细胞癌）、35例腺瘤（32例滤泡型、3例嗜酸细胞型）和65例非肿瘤性病变（25例结节性甲状腺肿、5例Grave病、19例淋巴细胞性甲状腺炎、6例桥本甲状腺炎、10例非甲状腺疾病切除的正常甲状腺组织），以滤泡上皮CD56阳性＞10%者为阳性表达，结果显示除PTC（包括乳头状型、滤泡型）外，其他各组病变均阳性，其诊断PTC的敏感性和特异性均为100.0%，指出CD56是诊断PTC非常有意义的抗体，特别是在鉴别滤泡型PTC和其他滤泡性肿瘤中具有重要意义。本研究显示，CD56在PTM中3例阳性表达，在增生性病变中22例表达，2组比较差异有统计学意义（P<0.01），CD56诊断PTM的敏感性为68.8%，特异性为95.9%，准确性为87.7%，提示CD56在PTM的鉴别诊断中具有一定的意义。
综上所述，部分PTM以滤泡状排列为主，核的特征不够典型，需要与增生性病变相鉴别。根据病变滤泡细胞普遍增生活跃，细胞核具有PTC的基本特点，肿瘤性滤泡穿插于硬化间质或周围滤泡之间，并与周围滤泡形成鲜明对比，多数病例可确诊。CK19、Galectin-3和MC弥漫性中强阳性表达和CD56不表达，对于PTM诊断有重要价值，联合应用4种抗体可以增加PTM诊断的特异性和准确性。
（转载自中国科教评价网www.nseac.com ）
【参考文献】
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