大鼠INS论文(2)
2014-09-23 01:43
导读:1.2方法 细胞接种于100 mm培养皿,每板加完全培养液12 mL,(8~9)×106个细胞,生长48~72 h后置于冰上冷却,PBS冲洗1次,用Trizol提取RNA. 将总RNA置于65℃在甲
1.2方法
细胞接种于100 mm培养皿,每板加完全培养液12 mL,(8~9)×106个细胞,生长48~72 h后置于冰上冷却,PBS冲洗1次,用Trizol提取RNA. 将总RNA置于65℃在甲酰胺/甲醛中变性10 min,用10 g/L琼脂糖凝胶(含2.2 mmol/L甲醛)电泳分离,转移至尼龙膜(hybond amersham),紫外交联后与32P标记的cDNA探针于42℃杂交过夜(5×SSPE, 5×Denhar