反相高效液相色谱法测定竺黄复方片中甘草酸的

【摘要】  目的采用反相高效液相色谱（RP睭PLC）法测定竺黄复方片中甘草酸的含量。方法采用kromasil C18柱（200 mm×4.6 mm,5 μm），以甲醇-0.2 mol·L-1乙酸铵-冰乙酸（65∶35∶1）为流动相，流速1 ml·min-1，柱温30 ℃，检测波长250 nm。结果在0.402～2.010 μg之间，峰面积与进样量的线性关系为A= 673 028.287 8C -67 302.707 6（r=0.999 8），平均回收率为99.66％。测得3批样品中甘草酸的含量（以甘草酸铵计）分别为1.034，1.103和1.008 mg/片。结论所建方法简便、准确、重复性好，可用于竺黄复方片的质量控制。

【关键词】  竺黄复方片； 甘草酸； 反相高效液相色谱法

　　Abstract：ObjectiveTo establish an HPLC method to determine glycyrrhizic acid from prescription of Zhuhuang Tablet.MethodsThe column was kromasil C18 (200 mm×4.6 mm,5 μm), the mobile phase consisted of Methanol～0.2 mol·L-1Ammonium acetate- Glacial acrtic acid (65:35:1), with the flow rate of 1 ml·min-1 and the UV detector was set at 250 nm.ResultsThe method showed a good range of 0.402～2.010 μg (r=0.999 8).The average recovery was 99.66%.The glycyrrhizic acid contents of three batch samples were 1.034, 1.103，1.008 mg, respectively.ConclusionThis method is simple, accurate, repeatable and suitable for the determination of glycyrrhizic acid in prescription of Zhuhuang Tablet.

　　Key words：Prescription of Zhuhuang Tablet；  Glycyrrhizic acid;  RP–HPLC

    竺黄复方片由甘草、力嘎都、牛黄、红花、榜嘎（唐古特乌头）等九味药材组成，具有利肺、消炎、止痛的功效，用于小儿流感引起的肺炎、上呼吸道感染等［1］。该方标准收载于《中华人民共和国卫生部药品标准》藏药第一册，标准未收载鉴别项和含量测定项，不利于生产和使用的相关部门控制其药品质量。本文拟建立甘草酸含量测定方法，增加含量测定项，提高其质量标准。

　　1  材料

    Waters2695/2690分离系统，2996（2487）检测器，Empower色谱管理系统，岛津UV-2100型紫外分光光度计，Atuto Science AS5150超声波清洗仪，Sartorius公司BP211D电子天平。甲醇为色谱纯，水为重蒸馏水，其它试剂均为分析纯。

　　2  方法与结果

　　2.1  甘草酸的含量测定

　　2.1.1  色谱条件和系统适用性实验用kromasil色谱柱（200 mm×4.6 mm,5 μm），流动相为甲醇-0.2 mol·L-1乙酸铵-冰乙酸（65∶35∶1），流速1 ml·min-1，柱温：30 ℃，检测波长250 nm［2］，按甘草酸铵峰计，色谱柱理论塔板数不低于2000，甘草酸铵峰与其它峰达到基线分离，峰形对称，色谱图见图1。

　　2.1.2  溶液的制备对照品溶液的制备：精密称取甘草酸铵对照品适量，置10 ml量瓶中，加甲醇-0.2 mol·L-1乙酸铵-冰乙酸（65∶35∶1）溶解并稀释至刻度，摇匀,使成为每毫升中含对照品0.201 mg的溶液即得。

    样品溶液的制备：取竺黄复方片适量，研细，取1.5 g，精密称定，置100 ml具塞锥形瓶中，精密加入甲醇-0.2 mol·L-1乙酸铵-冰乙酸（65∶35∶1）溶液45 ml，称定重量，超声处理30 min，放冷，称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液，用0.45 μm滤膜滤过即得。

    阴性样品溶液的制备：取缺甘草的阴性样品，照上述样品溶液制备方法处理即得阴性样品溶液。

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