1 引 言 卵巢癌是妇科死亡率最高的恶性肿瘤，化(4)

　　2004 年Klinger 等发现抗Lewis y 抗体能通过抑制EGFR 介导的信号转导通路MAPK 的磷酸化，促进肿瘤细胞的凋亡。p38MAPK 信号转导通路是MAPK 家族中的重要组成部分，其主要在一系列应激、凋亡和分化反应中起作用。目前已知一些促炎因子、应激刺激可激活p38MAPK，此外p38MAPK 还可被脂多糖及G+细菌细胞壁成份所激活。本实验通过RT-PCR，Western blot 法证实人卵巢癌RMG-I 细胞转染α1,2-FT 基因后p38MAPK mRNA 表达量明显增加。虽然转染前后细胞系p38MAPK 表达量没有明显的变化(P>0。05)，但是其磷酸化形式表达量却明显增加(P<0。05)。抗Lewis y 单克隆抗体可以阻断p38MAPK 的磷酸化，而且阻断效应随着时间的增加而加强(P<0。05)，说明Lewis y 抗原与p38MAPK 信号通路密切相关。p38MAPK 特异性抑制剂SB203580 作用后细胞凋亡明显增加，而凋亡因子caspase-3 在mRNA 和蛋白水平都随着抑制剂浓度的增加而显着增加，提示了卵巢癌RMG-I-H 细胞表面的Lewis y 抗原是通过激活p38MAPK 信号通路起到抑制凋亡的作用。

　　我们前期研究发现α1,2-FT基因转染后卵巢癌细胞RMG-I-H对卡铂的耐药性明显增强。

　　本实验利用卡铂和SB203580+卡铂作用于两细胞系，结果显示：两组细胞单用卡铂组p38MAPK 及caspase-3 相对表达强度均明显高于其相对的阴性对照组(P 均<0。05)，而转染后RMG-I-H细胞单用卡铂组p38MAPK 及caspase-3 相对表达强度均明显高于未转染RMG-I细胞单用卡铂组(P 均<0。05)，两细胞系SB203580+卡铂组p38MAPK 相对表达强度均明显低于相对的单用卡铂组(P 均<0。05)，同时caspase-3 相对表达强度均明显高于相对的单用卡铂组(P 均<0。05)，而两细胞系SB203580+卡铂组间p38MAPK 及caspase-3 相对表达强度没有明显的差异(P 均>0。05)，进一步说明提示细胞通过p38MAPK 途径抑制凋亡，参与细胞对卡铂的耐药。而Lewis y 作为EGFR 上的重要组成部分(结果未显示)，参与上述细胞的耐药。本硕士论文来源于中国硕士论文网，参考文献：http://www.lunwenad.com/wzlb-1.html，转载敬请保留链接，谢谢。

　　关于p38MAPK信号通路与细胞凋亡的关系，目前并没有统一说法。本实验通过RT-PCR、Western blot 法和流式细胞检测证实卵巢癌RMG-I-H 细胞表面的Lewis y 抗原通过激活p38MAPK 信号通路起到抑制凋亡的作用，在p38MAPK 特异性抑制剂SB203580 作用后细胞凋亡明显增加，而凋亡因子caspase-3 在mRNA 和蛋白水平都随着抑制剂浓度的增加而显着增加。Flacke JP [11]等报道p38MAPK 和Akt 激酶的短暂激活导致凋亡细胞的数量、caspase-3分裂和Bcl-xL 过表达都显着的减少，这些作用能被Akt-或者p38-的磷酸化形式的阻碍而阻断。Tsuchiya [12]等报道在结肠癌DLD-1 和SW480 细胞系中，p38MAPK 的抑制剂FR167653能剂量依赖方式抑制细胞的增殖，增加细胞凋亡，同时激活caspase-3, 8, 9，这些说明p38MAPK 信号通路有抑制细胞凋亡的作用。 另外，还有研究表明p38MAPK 有诱导细胞凋亡的作用，Tikhomirov[13]等认为，乳腺癌细胞中EGFR 和ErbB-2 的高表达可导致p38MAPK的持续激活，激活的p38MAPK 直接结合并磷酸化Bcl-2，进一步诱导下游caspases 的活化，引发细胞凋亡。LIU SI[14]等发现，邻乙汞硫基苯酸钠通过磷酸化p38MAPK 介导caspase-3 的活化，诱导SCM1 细胞Ca2 + 非依赖性凋亡。由此可见，虽然p38MAPK 在不同的细胞系中参与凋亡机制有所不同，这可能与细胞系的不同或者细胞周边环境的不同而引起，但值得关注的是p38MAPK 确实与肿瘤细胞凋亡密切相关，这有利于我们研究肿瘤耐药的机制，有助于我们探索对癌症治疗的新发现。

　　综上所述，本实验证实了细胞系RMG-I-H 表面的 Lewis y 抗原在通过p38MAPK 通路抑制凋亡、引起细胞耐药等方面起着重要的作用，我们认为Lewis y 抗原可能成为卵巢癌治疗及卵巢癌耐药机制研究的新靶点，将有利于改善临床卵巢癌的基因治疗和预后，其机制还有待于进一步的研究。