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全部作者: | 孔波 范健 石欣 张齐 杨正平 肖志 |
第1作者单位: | 东南大学附属中大医院普外科 江苏南京(210009) |
摘要: | 摘要:目的:探讨CDC25B基因的各剪切异构体在4种胰腺癌细胞株中的表达,构建并转染pcDNA-CDC25B3重组质粒,为阐明CDC25B在胰腺癌发生发展中作用机制提供基础。方法:采用RT-PCR检测Panc-1,SW-1990, Bxpc-3, CFPAC-1细胞株中的CDC25B的各剪切异构体mRNA表达水平,并采用Western blot检测CDC25B的蛋白在以上胰腺细胞系中表达水平。将获得的目的基因片段(CDC25B3CDS区)克隆于pcDNA3.1/(+)载体上,待测序鉴定后,脂质体转染至低表达CDC25B胰腺癌细胞系SW-1990,用G418筛选后进行RT-PCR和Western blot鉴定。结果:RT-PCR结果提示在Panc-1中CDC25B1与CDC25B2的表达强度无明显差异;CFPAC-1和SW-1990的CDC25B2 的表达高于CDC25B1;而Bxpc-3的CDC25B1的表达强度高于CDC25B2, CDC25B3在4种胰腺癌细胞株中表达均不显著。Western blot结果提示CDC25B蛋白在Panc-1和CFPAC-1过度表达,SW-1990的表达强度中等,Bxpc-3弱表达或不表达CDC25B蛋白;经测序鉴定后构建的重组质粒中含有CDC25B3 的CDS区,经pcDNA-CDC25B3转染的SW-1990细胞稳定过表达CDC25B3。结论:CDC25B1和CDC25B2在4种胰腺癌细胞株中过表达,而CDC25B3与胰腺癌关系尚不明了。本研究构建稳定过表达CDC25B3的胰腺癌细胞株SW-1990,为阐明CDC25B家族在胰腺癌发生发展中的作用提供基础。 |
关键词: | 胰腺癌 CDC25B 基因转染 剪切异构体 远程下载 (免费PDF全文) |
发表日期: | 2007年02月01日 |
同行评议: | 该文选题合理,研究方案在国内具有1定的创新性,设计方案和技术路线清晰明了,数据处理可靠,文字表达流畅,讨论分析客观深入。 |
综合评价: |
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修改稿: | |
注:同行评议是由特聘的同行专家给出的评审意见,综合评价是综合专家对各要素的评议得出的数值,以1至5颗星显示。 |